پایان نامه روش های بیوشیمی مطالعه سلول


دنلود مقاله و پروژه و پایان نامه دانشجوئی

پایان نامه روش های بیوشیمی مطالعه سلول مربوطه  به صورت فایل ورد  word و قابل ویرایش می باشد و دارای ۸۱  صفحه است . بلافاصله بعد از پرداخت و خرید لینک دانلود پایان نامه روش های بیوشیمی مطالعه سلول نمایش داده می شود، علاوه بر آن لینک مقاله مربوطه به ایمیل شما نیز ارسال می گردد

فهرست مطالب

فصل اول :   ۱
« روشهای بیوشیمی مطالعة سلول »   ۱
سیتوشیمی   ۲
اتورادیوگرافی ( AUTORADIOGRDHY ) :   ۳
جداسازی اجزاء سلول :   ۴
الکتروفورز ( ELECTROPHORESIS ) :   ۵
اساس کار به قرار زیر است :   ۶
فتومتری ( PHOTOMETRIE ) :   ۶
متد کشت سلول :   ۷
فصل دوم  :   ۱۰
«میکرو مور فولوژی سلول  »   ۱۰
غشاء سیتوپلاسمی ( Unit Membrane ) :   ۱۲
فصل سوم  :   ۱۸
«سـلــول و عمـــل آن »   ۱۸
سازمان بندی سلول :   ۱۹
ساختمان فیزیکی سلول :   ۲۱
ساختمانهای غشائی سلول :   ۲۲
آندو پلاسم و اندامکهای آن :   ۲۵
رتیکولوم آندوپلاسمیک :   ۲۶
لیزوزومها  Lysosomes  :   ۲۷
پروگزیزومها  Peroxisomes :   ۲۸
گرانولهای ترشحی :   ۲۹
میتوکندریها :   ۲۹
ساختمانهای رشته‌ای و لوله‌ای سلول :   ۳۰
هسته و غشاء هسته :   ۳۱
سلول حیوانی با اشکال پیش سلولی حیات :   ۳۲
عمل خوردن بوسیلة سلول  ـ آندوسیتوز :   ۳۳
فصل چهارم  :   ۳۵
«اسکــلت سلـولــی   ۳۵
THE CXTOSKLETON »   ۳۵
ضیبریلیهای سیتوپلاسمی و میکروتوبولها :   ۳۶
میکروتوبولها :   ۳۹
سانتریولها :   ۳۹
فصل پنجم :   ۴۴
« هستـه »   ۴۴
پوشش هسته‌ای :   ۴۸
غشاء داخلی :   ۵۰
اسکلت هسته‌ای :   ۵۱
شیرة هسته (کاریولنف = نوکلئوپلاسم )   ۵۴
هستک :   ۵۵
کروماتین ( Chromatine ) :   ۵۸
فصل ششم :   ۶۲
« روشهای بیوشیمی مطالعة سلول »   ۶۲
پیوستگی سلول ها :   ۶۶
ویژگی های عمومی سلول   ۶۷
مشاهده سلول زنده   ۶۷
ساختمان :   ۷۲
‌ویژگیهای کلی یافته :   ۷۳
نظریه یافته‌ای :   ۷۵
ساختار و اعمال یافته :   ۷۶
منابع و ماخذ :   ۷۶

منابع و ماخذ :

 

نویسنده : د.جی .مک کین، زیست شناسی مقدماتی، ترجمه : محمد علی شمیم

نویسنده : شیلر فیلیپ ، دونالدئی . بیانچی، زیست شناسی سلولی و مولکولی، ترجمه : فتح اله فتحی آذربایجانی

نویسنده : لوئی گالین کلود، زیست شناسی یاخته ای، ترجمه : بهروز شاهسون بهبودی ، خیر النساء محور ضمامی

نویسنده وایس پل ، کروف ریچارد، دانش زیست شناسی (۱)، مترجمان : حمیده علمی غروی ، حسین دانش فر ، مرتضی هنری

امتیازی، گیتی، کریمی، محسن، ۱۳۳۴، مبانی زیست مولکولی ، انتشارات مانی، اصفهان، ۱۳۸۰

سیتوشیمی

با کمک روشهای سیتوشیمی می‌توان ساختمانهای شیمیایی اجزاء سلول را در وضعیت طبیعی ( In Situ ) آن شناخت دو راه را برای این منظور وجود دارد :

۱) استفاده از مواد شیمیایی که در اثر تماس با مواد دیگر درون سلول واکنشی ظاهر سازند که به کمک میکروسکوپ الکترونی قابل رؤیت است .

برای مطالعة با میکروسکوپ نوری بایستی این مواد شیمیایی رنگی باشند و برای مشاهده در میکروسکوپ الکترونی باید این مواد مانع حرکت الکترونها، یا باعث پراکندگی آنها گردند. (۱)

۲ ) امکان دوم استفاده از آنزیم‌هایی است که بطور اختصاصی موادی را تجزیه نمایند این مواد بعداً در سلول قابل رؤیت نیستند تعیین اینکه محصول یک واکنش جزئی از ساختمان سلول است یا خیر زمانی ممکن است که نتیجه واکنش سبب انباشتگی و تراکم ماده مورد جستجو گردد علاوه بر این واکنش باید طوری اختصاصی باشد که قضاوت قابل اعتمادی را ممکن سازد از طرف دیگر اجزاء سلولی به قدر کفایت طبیعی باقی بمانند تا مقایسه و قضاوت را ممکن سازند (مثلاً تراکم موادی در میتوکندری زمانی قابل اثبات است که ساختمان میتوکندری به شکل طبیعی آن موجود باشد با دو مثال مطالب فوق روشن می‌گردد :

 

در نقاط مختلف سلول فسفاتاز یعنی آنزیمی که هیدرولیز فسفات را تسریع می‌نماید وجود دارد اگر یک سلول ثابت شده با آلدئید را (آلدئید فعالیت آنزیمی را از بین نمی‌برد) با مخلوطی از فسفات محلول و نیترات سرب مجاور کنیم (قطره‌ای روی بافت قرار می‌گیرد) در نقاطی که آنزیم موجود است فسفات هیدرولیز شده و تولید اسید فسفریک می‌نماید که خود در اثر ترکیب با نیترات سرب فسفات سرب به وجود می‌آورد .

این ترکیب غیر قابل حل در آب بوده و تولید رسوبی می‌نماید که به شدت الکترونها را متفرق می‌کند به این ترتیب تمام نقاطی که دارای فسفاتاز هستند در سلول مشخص می‌گردند .

دیواره غالب سلولهای گیاهی دارای سلولز می‌باشد که با املاح فلزات سنگین کنتر است ندارد اگر آنزیم سلولاز را روی سلول ثابت شده با آلدئید اثر دهیم سلولز به موادی که ملکولهای ریز قابل حل در آب تبدیل می‌گردند این عمل منجر به از بین رفتن کنتر است تقاطعی که قبلاً سلولز وجود داشت می‌گردد با این روش می‌توان پی به مقدار کمی سلولز در دیواره سلولزی و احتمالاً چگونگی سنتز آن پی برد . (۲)

 

اتورادیوگرافی ( AUTORADIOGRDHY ) :

ایزوتوپهای رادیواکتیو ایزوتوپهایی هستند که هسته آنها در اثر تشعشع پیوسته تحلیل می‌رود این گونه ایزوتوپها در سیتولوژی برای ردیابی مواد معینی در سلول به کار گرفته می‌شود با کمک منوساکاریدهای علامت‌گذاری شده با۱۴ Cمی‌توان بوسیله روشهای اتورادیوگرافی یا به طور مستقیم توسط اندازه‌گیری فعالیت تشعشعی اجزاء مختلف سلول سنتز پلی‌ساکاریدها را مشخص کرد روش اخیر با کمک دستگاه مخصوصی به نام سین‌سیلاسیون شمار (نور ساطع کردن و برق زدن = Scintilation ) انجام می‌گیرد .

در روش مستقیم اتورادیوگرافی می‌توان از میکروسکوپ نوری یا الکترونی استفاده کرد در هر دو مورد بافت بعد از دریافت ماده رادیو اکتیو ( خوراندن ـ تزریق ) ثابت آغشته و برش داده می‌شود مقاطع بعداً با لایه‌ای حساس یا فیلم پوشانده می‌شوند تشعشعات ماده رادیو اکتیو مثل اشعه نور صفحه فیلم یا ماده حساس دیگر را متأثر و فیلم پس از ظهور در محل سیاه شده مورد مطالعه قرار می‌گیرند شرط موفقیت دراتورادیوگرافی انتخاب ماده حساس برای پوشاندن مقاطع انتخاب زمان دقیق برای تأثیر اشعه و بالاخره ظاهر کردن مناسب ماده حساس یا فیلم می‌باشد معذالک نمی‌توان از این روش در هر موردی از سیتولوژی استفاده نمود اتورادیوگرافی بیش از هر روش دیگر به دقت و تجربه نیازمند است . (۲)

 

جداسازی اجزاء سلول :

برای انجام آزمایشات شیمی با اندازه‌گیری و مطالعه عمل اجزاء مختلفه یک سلول : لازم است که این اجزاء از بقیه قسمتها جدا گردند برای این منظور سلولها هموژن می‌شوند بعد محتویات سلولها با کمک اولترا سانتریفوژ به صورت بخشهای مستقلی که هر یک محتوی ساختمان خاصی از سلول هستند از هم جدا می‌گردند .

عمل هموژن کردن در سلولهائی که با دیواره سختی پوشیده نمی‌شوند از طریق شوک اسمزی با تأثیر امواج صوتی بالای Hkz 20 صورت می‌گیرد .

سلولهای بادیواره سخت بایستی در هموژنیزاتور با چاقو یا گلوله‌های شیشه‌ای ذرات کوارتز و نظایر آن ساییده شوند در هر حال این عمل نباید موجب آسیب و در نتیجه کاهش فعالیت اجزاء سلولهای گردد عمل سانتریفوژ کردن در دو مرحله انجام می‌گیرد :

۱ ) نوع ساده DiFFERENCIAL CENTIFU GATION

2 )‌جدا کردن به طریق هموژنی ( ISOPICNIC )

کروماتوگرافی ( CHROMATOGRAPHY ) :

با کمک روشهای کروماتوگرافی ملکولهای مختلف بر اساس ویژگیهای متفاوت خود نظیر ملکول‌ها ( فیلترژله‌ای ) حلالیت در دو فاز ( کروماتوگرافی تقسیمی ) و بالاخره خصوصیات جذبی ( کروماتوگرافی جذبی ) از یکدیگر جدا می‌گردند . (۳)

الکتروفورز ( ELECTROPHORESIS ) :

ملکولهای دارای بارالکتریکی نظیر اسیدهای آمینه و پروتئینها در یک میدان الکتریکی توجه به نقطه ایزوالکتریک خود با سرعتهای متفاوت مهاجرت می‌نماید این کیفیت را الکتروفورز  می‌گویند پس در این روش ملکولهای دارای بار الکتریکی بر حسب سرعت خود مشخص از یکدیگر جدا می‌گردند عمل الکتروفورز می‌تواند در یک محلول بافر انجام می‌گیرد غالباً برای محلول بافر که نقش الکترولیت را دارند ناقل سختی نظیر کاغذ لایه‌های نازک استات یازل پلی‌آکریل آمید ( Polyacrylamidgl ) انتخاب می‌گردد در اینجا ملکولها نه تنها به علت بار الکتریکی متفاوتشان بلکه بر حسب اندازه و شکل ملکول‌هایشان جدا می‌گردند هرچه وزن ملکولی بیشتر باشد حرکت ملکول کندتر است ساختمان فضائی ملکولها نیز در حرکتشان مؤثر است .

اساس کار به قرار زیر است :

ژل جدا کننده با ژل یک ثانویه باروزنه‌های درشت پوشیده می‌‌شود که روی آن محلول مورد آزمایش منتقل می‌گردد در میدان الکتریکی ملکولها در ژل ثانویه مهاجرت می‌نمایند و در مرز بین دو ژل در یک بخش نازک متمرکز می‌شوند در اینجا ملکولها در ژل جدا کننده ( اولیه ) بر طبق اندازه ملکولها و تحرک الکتروفورزی خود جدا می‌گردند بین ژل جدا کننده ( اولیه ) و ژل جمع کننده ( ثانویه )، دو عامل غیر هماهنگ PH و اندازه روزنه‌ها در دو ژل موجود می باشند . (۳)

فتومتری ( PHOTOMETRIE ) :

عده‌ای از اجزاء سلولی این خاصیت را دارند که امواج نوری با طول موجهای معین را جذب نمایند و با این کیفیت می‌توان این اجزاء را از نظر کیفی و کمی مورد مطالعه قرار داد . (۳)

 

متد کشت سلول :

تکنیک کشت سلول یا بافت در بیوشیمی بیولوژی ملکولی فیزیولوژی سلولی ژنتیک، جنین شناسی، انگل شناسی، بافت شناسی و غیره به کار می‌رود معمولی‌ترین سلولهایی که کشت داده می‌شوند سلولهای باکتریها و سلولهای بافتهای پستانداران هستند برای کشت سلول باید اول محیط کشت مناسب آن نوع سلول خاص تهیه گردد که در آن عوامل منبع انرژی سلولها، امواج، عوامل رشد، اسیدیته ( PH ) مناسب و حرارت مورد توجه قرار می‌گیرند .

محیط کشت سلولهای پستانداران پیچیده‌تر از محیط کشت مورد نیاز سلولهائی نظیر باکتریهاست در ابتدای کار کشت سلول این‌طور معمول بود که مخلوطی از سرم و عصارة جنین جوجه، به عنوان محیط کشت بکار برده می‌شدند در سلولهای اخیر محیط کشت ترکیبی درست شده که محتوی ترکیبات متعددی است بعنوان مثال می‌توان محیط کشت ترکیبی از آب، املاح و مواد معدنی و محتوی متابولیتهای زیادی باشد حتی امروزه علیرغم ترکیبات پیچیده محیطهای کشت ترکیبی به طور معمول لازم است که از سرم جنین یا سرم اسب و غیره بعنوان تکمیل کننده محیط کشت که باعث رشد سلول شود استفاده نمایند ساده‌ترین تکنیک برای مطالعه رشد سلولهای پرندگان و پستانداران متد برداشت بافت است قطعه کوچکی از بافت را روی لاملی که با قطره‌ای از پلاسمای جوجه و محیط کشت پوشیده است قرار می‌دهند پلاسما سخت شده و منعقد می‌گردد لامل بر روی یک لام گرد برگدانده می‌شود به طوریکه بافت و پلاسما در سطح زیرین قرار گیرند اطراف لامل توسط پارافین مذاب با قلم‌مو کاملاً مسدود و کشت در محیط با حرارت مناسب نگهداری می‌شود  .

کلیه عملیات کشت سلول از قبیل تهیه محیط کشت و وسائل جراحی و محل نگهداری بافت باید استریل شوند علاوه بر روش فوق روشهای دیگری از کشت بافت و سلول وجود دارند که طی آن سلولها را می‌توان در بطری و یا در ظرف پتری و غیره بر حسب نوع تجزیه کشت داد . (۴)

 

فصل دوم  :

  «میکرو مور فولوژی سلول  »

در این قسمت به مطالعه ساختمان کلی و میکروسکوپی یاخته‌های تغییر نیافته می‌پردازیم مطالعه ساختمان شکلهای تغییر یافته سلول بعداً مورد بحث قرار می‌گیرد .

بخش اول مربوط به سلول جنینی ( مریستمی ) بعد سلول جانوری تغییر یافته واختصاصات آن وبالاخره ساختمان باکتریها و سیانو فسیه‌ها یعنی نمونه‌های پروکاریوت مطالعه خواهند ( Prokaryotes ) البته باید توجه داشت که این گروه از سلولها مثل یوکاریوتها ( Eucytes ) شامل بخش شبه هسته یا به اصطلاح نوکلئوتید (Nucleoid ) پلاسما و دیواره می‌باشند .

در سلولهای گیاهی دیواره سلولی گاه‌گاه بوسیله کانالهائی که همان پلاسمودسماستا ( Plasmodesmata ) هستند قطع می‌گردد در داخل غشاء سیتو پلاسم و در مرکز آن هسته قرار گرفته که در آن کروماتین و هستک ( نوکلئوس ) جای دارند هسته با شبکه تور مانندی از جنس غشاء که در تمام سلول کشیده شده و آندوپلاسمیک رتیکولوم ( Endoplasmic Reticum ) خوانده می‌شود احاطه می‌گردد .

این غشاء‌ها بعد از برش به شکل دو خط باریک در سلول جلب توجه می‌کنند علاوه بر اینها ارگانلهای دیگر مانند میتوکندریها، پلاستیدها، سیتوزومها، دیکتیوزومها ( مجموع آنها دستگاه گلژی را می‌سازند ) ریبوزومها ( قسمتی از ER دانه‌دار ) واکوئلها و بالاخره اجزاء ذخیره‌ای نظیر کریستال پروتئین قطرات چربی در آن دیده می‌شوند دیکیتوزومها، ریبوزومها و شبکه آندوپلاسمی درون هیالوپلاسم ( بخش پلاسمای فاقد اندامک ) قرار دارند .

به استثنای پلاستیدها که در گیاهان سبز به وجود می‌آیند بقیه اجزاء درون سلول در قارچها و در سلولهای جانوری ( البته با تفاوتهائی ) هم وجود دارند واکوئلهای بزرگی که در سلولهای گیاهی وجود دارند پلاسمودسمها و تغییرات دیواره سلولزی از اختصاصات سلولهای گیاهی می‌باشند برعکس سانتریولها در سلولهای گیاهان عالی دیده نمی‌شوند ولی در تمام سلولهای جانوری همچنین در پروتوفیت‌های(Protophytes) دنیای گیاهان وجود دارند و در ساختن دوکها و سیستم حرکت مژه و تاژک ظاهر می‌گردند .(۳)

ساختمان ظریف سلول یوکاریوت

غشاء سیتوپلاسمی ( Unit Membrane ) :

 

70,000 ریال – خرید

تمام مقالات و پایان نامه و پروژه ها به صورت فایل دنلودی می باشند و شما به محض پرداخت آنلاین مبلغ همان لحظه قادر به دریافت فایل خواهید بود. این عملیات کاملاً خودکار بوده و توسط سیستم انجام می پذیرد.

 جهت پرداخت مبلغ شما به درگاه پرداخت یکی از بانک ها منتقل خواهید شد، برای پرداخت آنلاین از درگاه بانک این بانک ها، حتماً نیاز نیست که شما شماره کارت همان بانک را داشته باشید و بلکه شما میتوانید از طریق همه کارت های عضو شبکه بانکی، مبلغ  را پرداخت نمایید. 

 

 

مطالب پیشنهادی: برای ثبت نظر خود کلیک کنید ...

براي قرار دادن بنر خود در اين مکان کليک کنيد
به راهنمایی نیاز دارید؟ کلیک کنید


جستجو پیشرفته مقالات و پروژه

سبد خرید

  • سبد خریدتان خالی است.

دسته ها

آخرین بروز رسانی

    چهارشنبه, ۲۶ مهر , ۱۳۹۶

اولین پایگاه اینترنتی اشتراک و فروش فایلهای دیجیتال ایران
wpdesign Group طراحی و پشتیبانی سایت توسط دیجیتال ایران digitaliran.ir صورت گرفته است
تمامی حقوق برایbankmaghale.irمحفوظ می باشد.